標記細胞株的分離和培養要注意些什么？

標記細胞株是細胞系中特定標簽（Luc、GFP、RFP等）的穩定轉移，該細胞系可用作示蹤細胞，為細胞成像和體內成像提供了很大的便利。標記細胞株的分離和培養：1、在無(wú)菌條件下，取出1-3DSD大鼠的心房組織，然后用PBS清洗組織塊兩次，然后將組織切成1mm3左右；2、在組織塊中加入4ml酶消化液（0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶），懸停10s，37℃消化10min，然后用滴定管吹成單細胞懸液，自然沉淀收集取上清，用10%fbs培養基消化終止后置于4℃；3、剩余組織加入3～4m...

查看更多

細胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法要怎么操作？

凋亡或者說(shuō)程序性細胞死亡，是細胞內建的防御機制之一，在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過(guò)程與通路的異常，會(huì )導致多種疾病，包括腫瘤。目前至少有十數種檢測細胞凋亡的方法，從大框架上講，可以劃分為基于細胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標記三大類(lèi)。那么細胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法是怎么操作的呢？1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個(gè)細胞形態(tài)學(xué)概念。因此，鑒定凋亡的金指標，往往是基于形態(tài)學(xué)的。凋亡和另外一種主要的細胞死亡類(lèi)型“壞死”有著(zhù)顯著(zhù)的亞細胞形態(tài)差異。簡(jiǎn)而言之，在透射電鏡下，凋亡...

查看更多

細胞培養常見(jiàn)問(wèn)題和解答

在制藥行業(yè)，細胞培養已成為抗體生產(chǎn)的重要組成部分。細胞培養技術(shù)已被用于生產(chǎn)針對輪狀病毒、脊髓灰質(zhì)炎、天花、肝炎、風(fēng)疹和水痘的抗體?；诩毎牧鞲锌贵w也已獲準在美國和許多歐洲國家使用。那么細胞培養的前景如何？3D細胞培養出于多種原因，對2D細胞培養的需求正在增加。2D細胞培養方法包括在平面上將細胞培養成2D單層。二維貼壁細胞培養從根本上限制了細胞的產(chǎn)生。研究人員提出了3D細胞培養來(lái)解決這些問(wèn)題。這些培養物已被證明在一些基本生物學(xué)機制的研究中是有效的，例如細胞數量監測、細胞活力、...

查看更多

細胞凋亡檢測的常用檢測方法有這幾種

要了解細胞凋亡檢測方法，首先要了解細胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化，形態(tài)學(xué)觀(guān)察表明細胞凋亡的變化是多階段的。細胞凋亡往往涉及多個(gè)細胞，甚至少數細胞也異步發(fā)生。首先細胞體積縮小，連接消失，與周?chē)毎蛛x，然后細胞質(zhì)密度增加，隨后會(huì )發(fā)生一系列變化：線(xiàn)粒體膜電位消失；滲透率變化；將細胞c釋放到細胞質(zhì)中；核質(zhì)濃度、核膜和核仁碎裂；DNA被降解成180bp-200bp左右的片段，在細胞膜內形成囊泡；絲氨酸膜表面轉向磷脂膜內側；細胞膜結構仍然完好無(wú)損?？梢詫⒌蛲黾毎臍埡》指畎扇舾蓚€(gè)凋亡小體而不...

查看更多

3D細胞培養技術(shù)具有哪些實(shí)際意義？

作為生命科學(xué)領(lǐng)域的一項長(cháng)期技術(shù)，二維細胞培養使人類(lèi)能夠在體外研究細胞的生理和病理。然而，隨著(zhù)對細胞微環(huán)境概念的逐漸了解，科學(xué)家發(fā)現二維培養細胞的生理狀態(tài)和活性與體內細胞并不*一致，結果往往與動(dòng)物實(shí)驗和臨床結果不一致。實(shí)驗。因此，在過(guò)去的十年里，科學(xué)家們一直致力于開(kāi)發(fā)各種3D細胞培養技術(shù)，為細胞提供更類(lèi)似于體內環(huán)境的培養環(huán)境。研究人員逐漸意識到，為了在體外實(shí)現細胞的形態(tài)、結構和生理功能，3D細胞培養需要能夠模擬體內環(huán)境的關(guān)鍵特征，包括細胞、細胞和細胞外基質(zhì)之間的相互作用，以及細...

查看更多

對于耐藥細胞株的培養方法你了解多少？

耐藥細胞株在長(cháng)期保存和傳代過(guò)程中受到各種不穩定因素的影響，例如，細胞遺傳污染和基因變異。因此，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后，細胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變化，導致其生物學(xué)特性發(fā)生變化，從而降低動(dòng)物模型的一致性和可比性。因此，為了保證動(dòng)物模型的穩定性，必須對細胞株的質(zhì)量進(jìn)行監測。那么你對它的培養方法了解多少？所有轉染腫瘤和病毒的細胞都被認為具有潛在的生物危害，必須在二級生物安全平臺上操作，請注意防護。所有與該單元接觸的廢液和容器只能在高壓滅菌后丟棄。收到耐藥細胞株后，用倒置透鏡觀(guān)察整個(gè)細胞的生長(cháng)情...

查看更多

什么原因會(huì )導致胎牛血清FBS沉淀？

胎牛血清FBS是一種性能強的血清產(chǎn)品，適用于精細細胞系的培養，使用3次0.1μM過(guò)濾方法和40多項質(zhì)量控制測試。經(jīng)細胞培養試驗，該產(chǎn)品可用于腫瘤細胞、淋巴細胞、雜交瘤、內皮細胞等。經(jīng)過(guò)多道分離純化過(guò)濾工藝，質(zhì)地純凈，內毒素等免疫原性蛋白含量極低，適用于各種細胞的取樣培養，尤其是干細胞、原代細胞和其他血清依賴(lài)性高的細胞（如胚胎干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞和星形膠質(zhì)細胞），以及其他高要求的實(shí)驗研究對于血清質(zhì)量。胎牛血清FBS解凍要求：1、請在2℃～8℃的環(huán)境中解凍，不宜在較高溫度解凍...

查看更多

什么是充質(zhì)干細胞？它的實(shí)驗步驟又是怎樣的？

充質(zhì)干細胞是干細胞的一個(gè)研究分支，干細胞是一種具有自我復制和多向分化能力的細胞。它們可以不斷自我更新，在特定條件下轉化為一個(gè)或多個(gè)構成人體組織或器官的細胞。干細胞是人體的起源細胞，是構成人體各種組織器官的祖細胞。充質(zhì)干細胞是一種存在于多種組織（如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤(pán)組織、脂肪組織等）中的成體干細胞，具有多向分化潛能，是非造血干細胞。這種干細胞可以分化成多種間充質(zhì)細胞（如成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞等）或非間充質(zhì)細胞，具有分化潛能，具有*的細胞因子分泌功能。細胞模型已...

查看更多