1. 將實(shí)驗小鼠脫頸處死,75%乙醇浸泡5min,固定,備皮,取背部皮膚至于含雙抗的冷PBS緩沖液中。
2. 仔細剝離脂肪,血管等多余組織,PBS清洗,加胰酶消化1h。
3. 分離真表皮,去除表皮后,PBS清洗3次。
4. 將真皮部分于培養皿內剪碎,加入適量胰酶,轉移至15ml離心管內,37℃恒溫水浴消化1h。
5. 消化結束后,加入H-DMEM*培養基終止反應,1000rpm離心5min,棄上清。
6. PBS清洗一遍,離心棄上清。
7. 將清洗后的組織塊均勻鋪于6cm培養皿內,加入2ml*培養基,37℃,5%CO2培養箱內培養24h。
8. 第二天,補充培養基至5ml,繼續培養,3-4天后有細胞游出。
9. 7天后已有大量細胞游出,去除組織塊并換新鮮培養基繼續培養。
實(shí)驗圖例
細胞培養
上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專(zhuān)注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類(lèi)齊全的細胞系、質(zhì)量穩定的細胞培養試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)、專(zhuān)業(yè)周到的技術(shù)支持。本著(zhù)“守正創(chuàng )新,科學(xué)嚴謹"的理念,我們以高標準塑造行業(yè)品牌,以全新視野構建現代企業(yè),勇于探索和創(chuàng )新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區,與國內多家醫院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,贏(yíng)得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認可,我們保證將繼續為廣大科研用戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)!細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養基 | 血清 | 細胞培養添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等;ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測序分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實(shí)驗 | RIP 實(shí)驗 | ChIP實(shí)驗 | Co-IP實(shí)驗 | 質(zhì)譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測 等。
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