ChIP-Seq測序與分析

ChIP-Seq測序與分析

ChIP-Seq測序與分析 是指通過(guò)染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（ChIP）特異性地富集目的蛋白結合的DNA 片段，并對其進(jìn)行純化和文庫構建；然后對富集得到的DNA 片段進(jìn)行高通量測序，通過(guò)將獲得的數百萬(wàn)條序列標簽精確定位到基因組上，從而獲得全基因組范圍內與組蛋白、轉錄因子等互作的 DNA 區段信息，是目前在全基因組水平研究蛋白結合靶DNA序列的重要手段，為轉錄因子、組蛋白修飾、核小體定位等表觀(guān)遺傳學(xué)的研究提供有效方法。其將染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（Chromatin Immunoprecipitation，ChIP）與高通量測序（Sequencing）技術(shù)相結合，是研究體內蛋白質(zhì)與DNA相互作用的經(jīng)典實(shí)驗方法。

實(shí)驗流程

分析流程

該技術(shù)的主要優(yōu)勢：

1) 全基因組覆蓋：ChIP-seq相較于傳統的ChIP芯片，能夠實(shí)現全基因組范圍的、單堿基水平的蛋白結合位點(diǎn)篩選與鑒定；

2) 高靈敏度：每個(gè)樣本可獲得數百萬(wàn)條的序列標簽，可發(fā)現研究基因組上稀有的蛋白結合位點(diǎn)；

3) 高精確率：可獲得高水平的信噪比數據，準確區分真實(shí)事件與噪音，精確定位蛋白結合位點(diǎn)。

該技術(shù)在基礎研究中的應用：

1) 應用于轉錄因子結合位點(diǎn)的研究：ChIP-seq技術(shù)廣泛應用于與轉錄因子相關(guān)的生物學(xué)作用與相關(guān)機制的研究。分析轉錄因子在不同細胞、不同狀態(tài)下所發(fā)揮的作用；

2) 應用于組蛋白修飾的研究：ChIP-seq技術(shù)亦常應用于研究組蛋白的修飾分布，通過(guò)觀(guān)察組蛋白修飾的分布情況，進(jìn)一步明確組蛋白修飾所發(fā)揮的生物學(xué)作用；

3) 應用于核小體定位研究：運用ChIP-seq技術(shù)研究核小體的分布規律，進(jìn)而分析得知核小體對基因表達所產(chǎn)生的影響。